Trang chủ \ Trả lời bạn đọc \ Cách phân lập vi sinh vật hiếu khí và yếm khí như thế nào?
 
Cách phân lập vi sinh vật hiếu khí và yếm khí như thế nào? In Email
Thứ tư, 15/8/2012 13:54

Hỏi:

 

Cách phân lập các chủng VSV vi hiếu khí và yếm khí tùy nghi đơn giản (không có sử dụng máy móc đắc tiền chuyên dụng), kinh tế thấp, em cần phân lập trên môi trường gì (môi  trường này khác với môi trường nuôi cấy VSV hiếu khí là phải bổ sung chất gì) và cách phân lập như thế nào. Ứng dụng các chủng này để phân giải cellulose trong điều kiện vi hiếu khí hoặc kị khí có được không?

 

Em định làm 1 đề tài hè nhỏ chừng 6 tháng phân giải gốc rạ bằng chế phẩm vi sinh trong điều kiện ngập nước.

 

Xin giới thiệu cho em một số chủng VSV yếm khí hoặc yếm khí tùy nghi hoặc vi hiếu khí có khả năng phân giải tốt cellulose.

 

Mong sớm nhận được câu trả lời. Chân thành cảm ơn!

Địa chỉ email này đã được bảo vệ từ spam bots, bạn cần kích hoạt Javascript để xem nó.

 

Trả lời:

Các chủng vi sinh vật (VSV) trên trái đất rất đa dạng và phong phú, mỗi chủng VSV lại thích hợp với môi trường phân lập riêng và phương pháp phân lập cũng không giống nhau. Do câu hỏi của bạn không nêu rõ là muốn phân lập chủng VSV nào nên chúng tôi không thể cung cấp cho bạn thông tin về phương pháp phân lập được.

 

Muốn phân lập VSV bạn phải có tối thiểu các thiết bị, dụng cụ sau: nồi hấp tiệt trùng, tủ cấy vi sinh, đèn cồn, que cấy vi sinh, hóa chất cần thiết, đĩa petri, ống nghiệm…

 

Chúng tôi xin giới thiệu với bạn một số chủng vi sinh có khả năng phân giải cellulose:

 

- Số lượng các loài vi sinh vật tham gia sinh tổng hợp enzyme cellulase có trong điều kiện tự nhiên rất phong phú. Chúng thuộc nấm sợi, xạ khuẩn, vi khuẩn và trong một số trường hợp, các nhà khoa học còn thấy cả nấm men cũng tham gia quá trình phân giải này.

 

Một nghiên cứu đã được tiến hành và cho kết quả như sau: từ dịch dạ cỏ bò người ta phân lập được 4 dòng vi khuẩn Q4, Q5, Q8 và Q9 đều có khả năng sản sinh enzyme cellulase và phân giải hiệu quả giấy photocopy và rơm rạ. Phân tích di truyền phân tử dựa trên trình tự 16S rRNA cho thấy dòng vi khuẩn Q5, Q8 và Q9 đồng hình với dòng Bacillus megaterium, dòng vi khuẩn Q4 đồng hình với dòng Cellulomonas flavigena.

 

Quy trình phân lập vi khuẩn phân giải cellulose như sau:

Phân lập trên môi trường với nguồn carbon là giấy photocopy:

+ Cân 1g mẫu dịch dạ cỏ bò pha loãng với 100ml nước cất khử trùng.

+ Lắc 15 phút.

+ Hút 20μl dung dịch này trải đều trên môi trường M sau đó dùng giấy photocopy (được khử trùng và cắt tròn có đường kính bằng với đường kính bề mặt đĩa môi trường) áp sát trên bề mặt môi trường.

 + Ủ môi trường 5-10 ngày ở 30°C cho đến khi khuẩn lạc phát triển trên bề mặt giấy.

+ Tiến hành tách ròng từng khuẩn lạc trên môi trường CMC.

 * Môi trường M gồm:

+ 0,4g KH2PO4; 0,4g K2HPO4; 1g NH4Cl; 0,1g MgCl2; 0,2g Yeast extract; 6g NaHCO3; 0,5g Cysteine-HCl; 0,25g Na2S;  0,001g Resazarin; 10ml dung dịch khoáng; 10ml dung dịch vitamin; 20g Agar.

+ Thêm nước đến thể tích 1lít và điều chỉnh pH7.

Dung dịch khoáng gồm: 4,5g Nitrilotriacetic, 0,4g FeCl2, 0,12g CoCl2, 0,01g AlK(SO4)2, 1g NaCl, 0,02g CaCl2, 0,01g Na2MoO4, 0,1g MnCl2, 0,1g ZnCl2, 0,01g H3PO3, 0,01g CuSO4, 0,02g NiCl2, thêm nước đến thể tích 1lít.

 Dung dịch vitamin gồm: 2mg Biotin, 2mg Folic acid, 10mg Pyridoxine hydrochloride, 5mg Thiamine, 5mg Riboflavin, 5mg Nicotinic, 5mg Dl-calcium pantothenate, 0,1mg B12, 5mg D-amilobenzoic, 5mg Lipoic, thêm nước đến thể tích 1lít.

* Môi trường CMC gồm:

+ 1g (NH4)2SO4; 1g K2HPO4; 0,5g MgSO4.7H2O; 0,001g NaCl; 10g CMC, 2g Agar.

+ Thêm nước đến thể tích 1lít và điều chỉnh pH7.

Thân chào bạn!                   

Phan Thị Bé Hiền

Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng

 
 

Thông Tin Đối tác

MayNongNghiep